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固相萃取儀在檢測食品中三聚氰胺檢測中的應用
更新時(shí)間:2020-12-24   點(diǎn)擊次數:1842次

固相萃取儀在檢測食品中三聚氰胺檢測中的應用

 

三聚氰胺是一種重要的氮雜環(huán)有機化工原料,水溶液顯弱堿性,能溶于甲醇、乙酸等,微溶于水和乙醇,不溶于C4H10O、苯等,而且在傳統C-18柱上保留很 差。利用此特性,人們普遍采用離子對試劑液相色譜法和液質(zhì)聯(lián)用方法進(jìn)行檢測。但由于食品基質(zhì)復雜,使得樣品的處理甚關(guān)鍵。我們采用三酸提取,固相萃取小柱凈化,輔以固相萃取儀操作,建立一套快速、準確、重現性良好的樣品外理方法。

 

主要儀器與試劑

高效液相色譜儀、配四元梯度泵、在線(xiàn)真空脫氣機、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測器、固相萃取儀、超聲波清洗器、離心機、固相萃取小柱:OASIS MCX,6mL,500mg。三聚氰胺標準品,純度99%。

 

樣品處理

提取:準確稱(chēng)取經(jīng)粉碎混勻后樣品5.0g,加入50mL 1%三氯醋酸溶液及2 mL 2%乙酸鉛溶液,混勻后超聲提取30min,高速離心后取上清液待凈化。

 

凈化:將固相萃取小柱(6mL,500mg)置于固相萃取儀樣品架上,分別加入5mL甲醇、5mL水活化,再準確移取5.0mL離心液上柱。活化及上 樣時(shí),將樣品架升至頂部通過(guò)調節面板旋鈕來(lái)調節N2氣流小,控制流速不超過(guò)1mL/min。然后再用5mL水、5mL甲醇洗滌SPE   柱,棄去洗脫液,將小柱升至頂部調節氣閥旋鈕自動(dòng)加壓吹干小柱,用5%氨水甲醇溶液5mL洗脫,收集洗脫液用氮吹儀吹干,用甲醇-水(2:8,V/V)定 容至1.0mL,過(guò)0.45μm濾膜,上機測定。

 

樣品提取與凈化

三氯醋酸具有沉淀乳及其制品中蛋白質(zhì)的作用,而且有助于三聚氰胺的溶解.由于三聚氰胺呈弱堿性。(弱陽(yáng)離子化合物),采用陽(yáng)離子交換柱進(jìn)行凈化可達到去除雜質(zhì),提高檢測靈敏度、重現性和回收率的效果。

 

固相萃取儀的應用

固相萃取儀具有高效、簡(jiǎn)便的特點(diǎn)。它可通過(guò)該裝置中的氣流調節閥來(lái)控制小柱流速的大小,并可直接吹干小柱,保證每小柱在活化洗脫過(guò)程中具有良好的重現 性。并且可配套不同規格的固相萃取小柱(如1mL,3mL,6mL等)使用,一次操作可同時(shí)處理48個(gè)樣品。我們在奶粉中添加(2.0~50.0)   ug/mL等不同濃度的三聚氰胺,進(jìn)行加標回收和重現性實(shí)驗,回收率在95~99%之間。相對標準偏差均小于3%。

 

結論

固相萃取儀的加壓操作是通過(guò)在固相萃取小柱的上方施加一定壓力空氣或N2來(lái)實(shí)現。

 

這樣可加快過(guò)濾速度,控制柱子活化、淋洗、洗脫全過(guò)程的流速,使溶液易于進(jìn)入固定相孔隙,有利于樣液與固定相緊密接觸,從而提高萃取效果。它克服常規 的手動(dòng)固相萃取操作費時(shí)、不能確保穩定的流速、不同人員操作結果偏差較大的問(wèn)題,通過(guò)簡(jiǎn)單的控制消除人為操作的誤差,保證在短時(shí)間內同時(shí)處理幾十個(gè)樣品并具有良好的重現性。

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